Sắc ký rây phân tử và những điều cần biết

1. Sắc ký rầy phân tử là gì?

Sắc ký rây phân tử (SEC) là một phương pháp sắc ký trong đó các phân tử trong dung.

Dịch được phân tách theo kích thước của chúng và trong một số trường hợp là trọng lượng phân tử.

Nó thường được áp dụng cho các phân tử lớn hoặc phức hợp đại phân tử như protein và polyme công nghiệp. 

Thông thường, khi dung dịch nước được sử dụng để vận chuyển mẫu qua cột, kỹ thuật này được gọi là sắc ký lọc trên gel.

So với tên sắc ký thấm qua gel được sử dụng khi dung môi hữu cơ được sử dụng làm pha động. 

Cột sắc ký được đóng gói bằng các hạt mịn, xốp, thường bao gồm các polyme dextran , agarose hoặc polyacrylamide. Kích thước lỗ của các hạt này được sử dụng để ước tính kích thước của các đại phân tử. 

SEC là phương pháp mô tả đặc tính polyme được sử dụng rộng rãi.

Vì khả năng cung cấp kết quả phân bố khối lượng phân tử tốt cho polyme.

2. Sắc ký rây phân tử vận hành như thế nào?

Mẫu được đưa vào cột chứa đầy gel hoặc một loại vật liệu xốp, và được pha động dẫn chạy qua cột. 

Sự chia tách theo kích thước được thực hiện nhờ.

Sự trao đổi lặp đi lặp lại các phân tử chất tan giữa dung môi pha động và cùng dung môi đó được pha tĩnh giữ ở trong các lỗ xốp của gel.

Khoảng kích thước lỗ của vật liệu nhồi trong cột.

Xác định khoảng kích thước phân tử được chia tách qua quá trình sắc ký.

Những phân tử có kích thước đủ nhỏ để có thể đi vào trong tất cả khoảng không gian của lỗ xốp.

Và được rửa giải trong tổng thể tích thấm Vt.

Các phân tử có kích thước lớn hơn kích thước lỗ xốp lớn nhất chỉ di chuyển được dọc theo cột qua các khoảng trống giữa các hạt vật liệu nhồi mà không bị giữ lại.

Được rửa giải trong thể tích loại trừ Vo (thể tích trống).

Sự chia tách theo kích thước phân tử xảy ra giữa thể tích trống và tổng thể tích thấm.

Chia tách hiệu quả thường được thực hiện ở hai phần ba đầu tiên của khoảng này.

3. Cách ứng dụng của các kỹ thuật sắc ký rây phân tử

Kỹ thuật sắc ký lọc trên gel ứng dụng chính là phân đoạn protein và các polyme hòa tan trong nước khác

Kỹ thuật sắc ký lọc trên gel ứng dụng chính là phân đoạn protein và các polyme

ký thấm qua gel được sử dụng để phân tích sự phân bố trọng lượng phân tử của các polyme hòa tan hữu cơ.

Ngoài ra một ứng dụng khác của sắc ký rây phân tử là.

Kiểm tra tính ổn định và đặc tính của chất hữu cơ tự nhiên trong nước.

4. Một số vật liệu thường được sử dụng cho hạt gel xốp trong sắc ký rây phân tử

5. Ưu điểm và nhược điểm

5.1 Ưu điểm

Ưu điểm của phương pháp này bao gồm khả năng tách tốt các phân tử lớn khỏi các phân tử nhỏ với thể tích rửa giải tối thiểu

Và có thể áp dụng nhiều giải pháp khác nhau mà không can thiệp vào quá trình lọc.

Đồng thời bảo toàn hoạt tính sinh học của các hạt để tách. 

Kỹ thuật này thường được kết hợp với các kỹ thuật khác để phân tách các phân tử theo các đặc điểm khác.

Chẳng hạn như tính axit, tính bazơ, điện tích và ái lực đối với các hợp chất nhất định. 

Với sắc ký loại trừ kích thước, có thời gian phân tách ngắn và được xác định rõ và dải hẹp, dẫn đến độ nhạy tốt. 

Cũng không có hiện tượng mất mẫu vì chất hòa tan không tương tác với pha tĩnh

5.2 Nhược điểm

Khi thực hiện phương pháp này, dải của các phân tử rửa giải có thể được mở rộng.

 Điều này có thể xảy ra do sự nhiễu loạn gây ra do dòng chảy của các phân tử pha động đi qua các phân tử của pha tĩnh. 

Bên cạnh việc mở rộng, các dải cũng chồng lên nhau. Kết quả là, dung dịch rửa giải thường bị pha loãng đáng kể. 

Một vài biện pháp phòng ngừa có thể được thực hiện để ngăn chặn khả năng mở rộng của các dải. Ví dụ, người ta có thể áp dụng mẫu trong một dải hẹp, tập trung cao độ trên đỉnh cột. Dung dịch rửa giải càng đậm đặc thì quy trình càng hiệu quả. 

Tuy nhiên, không phải lúc nào cũng có thể cô đặc dung dịch rửa giải, đây có thể coi là một nhược điểm nữa. 

Khách hàng cần tư vấn và báo giá về dịch vụ sắc ký tại Techtra xin vui lòng liên hệ:

Số hottline: 0376 968 518

Email: info@techtra.vn

Website: www.techtra.vn

Địa chỉ: Phòng 002, Tòa nhà I, Khu Công nghệ phần mềm Đại Học Quốc Gia, Số 3 Đường Võ Trường Toản, Phường Linh Xuân, TP Thủ Đức, TPHCM.